人々の “健康促進” のために!

人々の “健康促進” のために!
2015年春、沖縄の琉球大学キャンパス内 (産学共同研究棟) に立ち上げた “PAK研究センター” の発足メンバー(左から4人目が、所長の多和田真吉名誉教授)
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2015年5月19日火曜日

線虫 “エレガンス” の研究はノーベル賞への "早道" (High-Way)!

最近出版された(大島靖美著) “線虫の研究とノーベル賞への道“は、”ノーベル賞を取りたかったら、線虫 (エレガンス) の研究をやれ“ という, 野心的な生物学者に向けた熱いメッセージになろう。 もちろん、どんな研究でも始める際、奇抜な発想が必要ではあるが、線虫を使う研究は、他の動物実験より、全てが短時間かつ安価に済ませることができる利点がある。 そこで、(癌研究者の)私自身でさえ, 数年前にPAK遺伝子欠損株 (RB689) が野生株よりずっと長生きすることを発見して以来、"健康長寿に役立つ" (副作用のない)PAK遮断剤を手早くスクリーニングすることを目指して、線虫実験を続けている。

著者は線虫研究のベテランで、私と同じ大学を卒業したほぼ同年配の理学博士である。もっとも、主な研究対象はRNAで、"創薬をめざす"薬学出身の私とはかなり違う。線虫研究の草分けであるブレナーを始め、干渉RNAを発見したファイアとメロ両氏、さらにオワンクラゲ由来のGFP(蛍光蛋白)を線虫で初めて発現したチャルフィーらの武勇伝が、この本で丁寧に紹介されている。さらに、線虫とは直接関係ないが、GFPを半世紀以上前に発見して、数年前にノーベル賞をもらった下村さんのルシフェリンや蛍光蛋白に関する研究エピソードも詳しく紹介されている。

(PAK遮断剤で処理すると) HSP16-GFPを発現する特殊な線虫株 (CL2070 を使用する私には、(当然のことながら)既知の内容が多かったが、これから線虫に挑戦したいと志す若い冒険好きな研究者たちには、大変有益な啓蒙書である。

もっとも、線虫には視覚神経や心臓などの循環器系がない。 従って、これらの分野に特に興味を持つ者は、脊椎動物であるメダカやオタマジャクシなどを実験材料として、選ぶべきであろう。 勿論、iPS研究もノーベル賞への早道らしいが、功を急ぎ過ぎて、墓穴を掘る人々がかなり目立つ。 “朝ドラ”ではないが、“地道にコツコツ” 研究しよう!


2015年5月16日土曜日

PAK遮断剤には強い発毛作用がある!

従来から使用されている一連の抗癌剤 [DNA/微小管毒] には例外なく、強い“脱毛”や”免疫機能の低下”という副作用がある。ところが、プロポリスなどの天然 PAK遮断剤を併用すると、脱毛が起こらなくなるし、免疫能力が逆に高まる。言い換えれば、
PAK遮断剤は、癌細胞の増殖を抑える一方、正常な (毛髪や免疫) 細胞の速い増殖をより促進する働きがあるようである。
つい最近、北大農学部の研究グループ 
(小林 謙教授ら) によって、マウス実験で、プロポリス  (ARC-based Brazilian green propolis) の発毛促進作用がハッキリ実証された ()

従って、沖縄にある(健康長寿に寄与する)種々の植物 (例えば、月桃、大葉木ゴーヤなど) のエキスにも、美白作用ばかりではなく、発毛促進作用もあることが大いに期待できる。老いても、肌にシミがなく、ふさふさととした髪を保ちたいと願っている男女には、プロポリスをはじめとするPAKを遮断する様々な天然エキスの使用をお勧めしたい。

参考文献:
Shota Miyata , Yozo Oda , Chika Matsuo , Haruto Kumura , and Ken Kobayashi *
Stimulatory Effect of Brazilian Propolis on Hair Growth through Proliferation of Keratinocytes in Mice J. Agric. Food Chem., 2014, 62, 11854–61

2015年5月13日水曜日

“マカロニ西部劇・沖縄流” (非放射性) “キナーゼ” 定量法 :
免疫沈降法(IP) plus ATP-Glo kinase assay

最近、沖縄の琉球大学構内に新設したPAK総合研究所で、留学院生と共に、(放射性アイソトープを使用しない)免疫沈降法(IP を利用した簡便な新しいPAK定量法 ”沖縄流” を開発したが、良く文献を調べてみると、なんと10年前に、イタリアの研究グループが、別のキナーゼ(CDK をモデルにして、良く似たキナーゼ定量法をすでに開発していたことが判明、我々のIdea (沖縄流) は独自だったが、生憎10年遅れに終わった! そこで、このユニークな定量法[マカロニ西部劇 (Macaroni-Western)・沖縄流]を以下“英語”で簡単に紹介しよう。 この方法を使えば、健康長寿に役立つ各種のPAK遮断剤を細胞培養系で敏速にスクリーニングしうる。 なお、数年前に我々は線虫(HSP16-GFPを発現するCL2070株など)を実験動物として使用して、PAK遮断剤を安価かつ敏速にスクリーニングする方法も開発している。

従来は、非放射性PAK活性定量法として、pPAK免疫ブロット (Western Blot) 法というのが使用されていた。この方法は、細胞中でPAKが活性化されると、ある特定のセリンあるいはスレオニンがリン酸化されるという現象を利用したもので、例えば、スレオニン423が自己リン酸化されたpPAKに対する抗体で、PAK活性を定量する。しかしながら、我々は、PAKが活性化されても、pPAKが全く上昇しない例を、しばしば観察している. 一例をあげれば、メラニン色素の合成を刺激するホルモンは、細胞内でPAKを活性化するが、pPAKの上昇は全く見られない。 従って、“沖縄流” で細胞中のPAK活性を直接定量する必要がある。


 
Tagliati F, Bottoni A, Bosetti A, Zatelli MC, degli Uberti EC. Utilization of luminescent technology to develop a kinase assay: Cdk4 as a model system. J Pharm Biomed Anal. 2005; 39: 811-4.

要旨

Here, a simple, effective, non radioactive method to measure kinase activity of immunoprecipitated proteins is described. Cdk4, a cell cycle dependent enzyme, was immunoprecipitated IP  from whole cell extracts and used in kinase reactions. This system has been developed taking advantage of the kinase-Glo reagent (Promega), based on ATP depletion technology, but with a wider range of applications. The original aim of the commercial luciferase kit is the evaluation of kinase activity of highly purified enzymes, while this system enabled the evaluation of native kinases, retrieved by IP It is suitable for monitoring the changes in a given kinase activity in cells (independent of auto-phosphorylation sites), and useful for a quick screening for "highly cell-permeable" and  "specific" kinase inhibitors from chemical libraries or herbal extracts.

2015年5月9日土曜日

ニンニク由来のポリフェノールに美白作用・養命効果あり。

中国西部の研究グループ(蘭州大学薬学部)からの最近の報告によれば、ニンニクには、美白作用を持つポリフェノール、(S)-N-trans-feruloyloctopamine、が含まれているという (1)。このポリフェノールの化学構造は、(やはり美白作用を持つ)PAK遮断剤であるCAPEやクルクミンによく似ている。 従って、ニンニク由来のポリフェノールもPAK遮断剤である可能性が高い。 ちなみに、ニンニクのエキスには、抗癌作用や抗炎作用などもあり、さらに最近の研究では、線虫の寿命を延ばすことも判明した(2)。 いいかえれば、ニンニクをたっぷり使った料理(餃子やキムチなど)には、若返り(健康長寿)と美白を増進する薬効があることになる。なお、このポリフェノールの化学構造は比較的簡単なので、この化学合成が中国科学技術大学チームにより数年前に成功、特許済みである。

参考文献:
1.See comment in PubMed Commons belowWu Y1, Wu ZR2, Chen P2, Yang-Li2, Deng WR1, Wang YQ2, Li HY3. Effect of the tyrosinase inhibitor (S)-N-trans-feruloyloctopamine from garlic skin on tyrosinase gene expression and melanine accumulation in melanoma cells. Bioorg Med Chem Lett. 2015 ; 25: 1476-8.
2.Huang CH1, Hsu FY2, Wu YH2, Zhong L3, Tseng MY4, Kuo CJ2, Hsu AL5, Liang SS6, Chiou SH7. Analysis of lifespan-promoting effect of garlic extract by an integrated metabolo-proteomics approach. J Nutr Biochem. 2015. pii: S0955-2863(15)00071-6.